Kromasil液相色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應(yīng)先用10%左右的低濃度的有機(jī)相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機(jī)相中很容易析出,堵塞色譜柱。
Kromasil液相色譜柱中的流動相是否會排干?不少做色譜分離試驗的人遇到過這樣的情形:不慎未及時補(bǔ)充流動相,泵將溶劑瓶中的流動相吸干了,HPLC系統(tǒng)由此而停止工作了。如此情況是否會損壞Kromasil液相色譜柱?泵是否已將色譜柱中所有流動相都排干了?液相色譜柱還能使用嗎?
事實上,如果泵將溶劑瓶中的流動相吸干,并不會造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣,泵也不會將空氣排入Kromasil液相色譜柱。因為泵只能輸送液體,而不能輸送空氣。相比之下,另一個更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。
同樣,整個色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生,多半可能只是色譜柱兩端的幾個毫米變干了,因揮發(fā)掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當(dāng)長的時間。
即使Kromasil液相色譜柱真的變干了,也不一定就不可救藥了。可以嘗試用一種*脫氣的、表面張力低的溶劑沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤填料表面;已脫氣的溶劑應(yīng)該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。大約需要沖一個小時或更多的時間被*浸潤,恢復(fù)到正常狀態(tài)。